雙縮脲試劑

雙縮脲試劑（英語：Biuret reagent）是一種用於鑑定蛋白質的分析化學試劑。它是一個鹼性的含銅試液，呈藍色，由1%強鹼（氫氧化鈉/氫氧化鉀等）、幾滴1%硫酸銅和酒石酸鉀鈉配製。當底物中含有肽鍵（多肽）時，試液中的銅與多肽配位，配合物呈紫色。可通過比色法分析濃度，在紫外可見光譜中的波長為540 nm。鑑定反應的靈敏度為5～160 mg/mL。

雙縮脲試劑中真正起作用的是硫酸銅，而氫氧化鉀僅僅是為了提供鹼性環境，因此它可被其他鹼，如氫氧化鈉所代替。向試劑中加入碘化鉀，可延長試劑的使用壽命。

使用方法：先將雙縮脲試劑A（氫氧化鈉溶液）加入組織樣液，振盪均勻（必須營造鹼性環境），再加入雙縮脲試劑B（硫酸銅與酒石酸鉀鈉的混合溶液），振盪均勻。如果組織里含有蛋白質，那麼會看到溶液變成紫色。具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑產生紫色反應。蛋白質的肽鍵在鹼性溶液中能與Cu²⁺絡合成紫紅色的絡合物。顏色深淺與蛋白質濃度成正比。

參見

參考資料

化學試劑

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