巢式聚合酶鏈式反應

巢式聚合酶鏈式反應 （ Nested PCR ）是對聚合酶鏈式反應的一種改進，旨在減少意外引物結合位點的擴增導致的產物中的非特異性結合。

圖解巢式PCR方法

聚合酶鏈式反應

聚合酶鏈式反應本身是通過溫度介導的DNA聚合酶擴增DNA樣品的過程。該產品可用於測序或分析，該過程是許多遺傳學研究實驗室的重要組成部分，也用於法醫和其他人類遺傳病例的DNA指紋識別。常規PCR需要與靶DNA末端互補的引物。PCR產生的產物量隨反應所經歷的溫度循環次數而增加。常見的問題是引物與DNA的不正確區域結合，產生意想不到的產物。該問題發生的可能性隨PCR循環次數的增加而增大。

引物

巢式聚合酶鏈式反應涉及兩組引物，用於連續兩次進行的聚合酶鏈式反應，第二組引物用於擴增第一批產物中的次級靶標。這樣可以在第一輪擴增時進行少量擴增，從而限制非特異性產物。第二組嵌套引物應僅從第一輪擴增中擴增目標產物，而不擴增非特異性產物。這樣可以運行更多的總周期，同時最大程度地減少非特異性產物。這對於罕見模板或高背景的PCR非常有用。